本发明公开了一种甘油解反应制备偏甘油酯的方法，包括以下步骤：(1)制备Lipase MAS1突变体的固定化脂肪酶；Lipase MAS1突变体为MAS1H108A，其氨基酸序列如SEQ NO.2所示；(2)酶催化甘油解反应制备偏甘油酯，按质量份计，将1～10份植物油，1～4份的甘油，0～40份有机相试剂，与0.2～1.5份固定化脂肪酶混合，在40～55℃的温度下反应1～6小时，得到产物混合物；(3)产物混合物经分离得到偏甘油酯。本发明工艺简单，反应速率快，生成物含量高，不存在副反应。